培养专题-RAW264.7细胞培养常见问题

认识RAW264.7

中文名称：小鼠单核巨噬细胞白血病细胞

英文名称：RAW 264.7;RAW264; RAW2647; RAW264.7; RAW-264.7; Raw 264.7; Raw264.7

细胞背景：此细胞株源自BALB/c小鼠由Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤。可产生溶菌酶；sIg-,Ia-，Thy-1.2-。为检测到病毒颗粒的分泌，XC斑点形成试验阴性。该细胞可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖；可以经抗体依赖分裂绵羊红细胞与肿瘤靶细胞；LPS或PPD处理2天可诱导分裂红细胞，但对肿瘤靶细胞无作用。 

STR位点信息：

 Mouse STR 1-115,16

Mouse STR 1-217

Mouse STR 2-116

Mouse STR 3-214

Mouse STR 4-222.3

Mouse STR 5-514

Mouse STR 6-418

Mouse STR 6-712

Mouse STR 7-125.2

Mouse STR 8-113

Mouse STR 9-215

Mouse STR 11-217

Mouse STR 12-116

Mouse STR 13-116.2

Mouse STR 15-322.3

Mouse STR 17-214,16

Mouse STR 18-318

Mouse STR 19-214

Mouse STR X-124

ATCC参考图片：

培养注意事项：

关于细胞特性：该株巨噬细胞形态上包含松散贴壁的纺锤形和圆形或者立方形的细胞。当细胞密度较大时，细胞会轻微脱落变圆或者许多细胞堆在一起，有些细胞甚至脱落漂浮，这些漂浮的细胞是存活的，在传代时应收集起来离心，细胞沉淀可以继续培养。该株细胞体积较小，铺满培养瓶/培养皿底面积50%以后，需增加换液的培养基体积，以保证细胞有充足养分。

关于传代：RAW264.7细胞传代可采用胰酶消化方法和直接用细胞刮刀的方法。

关于培养基：DMEM，10%FBS；建议用优质胎牛血清，否则可能引起细胞贴壁能力变化，甚至导致细胞分化。

关于冻存：该细胞体积偏小，建议细胞冻存密度维持在2-3×10 ⁶/ml。

冻存液配方：完全培养液95%，DMSO 5%%（冻存时候可以适当提高血清浓度，DMSO维持在5-10%的比例即可）。也可使用成品的冻存液，但最好在冻存细胞时候经过梯度降温。

关于复苏：细胞复苏的存活率在70%左右

关于运输：该株细胞增殖较快，且存在疏松贴壁细胞，收到后会有细胞悬浮，培养基颜色可能会偏黄。不建议收集培养基使用。

使用正确的培养基，优质的血清，掌握细胞特性，RAW26.7细胞的培养就不是什么难事了。