培养专题-SH-SY5Y细胞培养常见问题

认识SH-SY5Y

中文名称：人神经母细胞瘤细胞

英文名称：SH-SY5Y；SHSY5Y; SHSY-5Y; SH-Sy5y; SK-SH-SY5Y; SY5Y; SH-SY5Y Parental

细胞背景：SH-SY5Y是1970年建自骨瘤转移灶的神经母细胞瘤SK-N-SH细胞系经三次克隆后的亚系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。该细胞显示中等水平的多巴胺-β-羟基酶活性。SH-SY5Y细胞的饱和密度大于1X10⁶细胞/cm²。

STR位点信息：Amelogenin:X；CSF1PO:11；D13S317:11；D16S539:8,13；D18S51:13,16；D19S433:13,14；D21S11:31,31.2；D2S1338:17,19；D3S1358:15,16；D5S818:12；D7S820:7,10；D8S1179:15；FGA:23.2,24；TH01:7,10；TPOX:8,11；vWA:14,18

参考图片：

培养注意事项

关于消化：SH-SY5Y细胞在达到可以消化时候细胞与细胞之间的连接会比较紧密，而细胞相对的则贴壁没有很牢固。因此在消化的时候需注意，在消化到细胞大部分脱落的时候，要观察细胞是否是成团块脱落的，如果是这种状态的细胞则需要尽可能的将细胞分散，避免传代后大部分细胞聚团。具体的可通过适当延长消化时间，或者在细胞成片脱落时候可适当吹打将细胞尽可能分散后再进行终止消化

关于培养基：MEM/F12，10%FBS，NEAA，丙酮酸钠，Gluta-max；建议用优质胎牛血清。

关于冻存：该细胞体积偏小，建议细胞冻存密度维持在1-2×10 ⁶/ml。

冻存液配方：完全培养液95%，DMSO 5%%（冻存时候可以适当提高血清浓度，DMSO维持在5-10%的比例即可）。也可使用成品的冻存液，但最好在冻存细胞时候经过梯度降温。

关于复苏：细胞复苏的存活率在70%左右，贴壁时间

关于运输：该细胞贴壁不牢固，长途运输后很可能会有大部分细胞脱落，收到细胞后，放培养箱稳定2小时，可以通过离心收集依旧没有贴壁的细胞，使用0.05% Trypsin-0.53 mM EDTA 消化后继续培养。贴壁细胞根据密度进行传代或者换液培养

以上就是我对SH-SY5Y一些培养经验，欢迎大家一起交流学习